首页 期刊 淡水渔业 大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达 【正文】

大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达

作者:余波; 王芳; 康超; 李永霞; 周思旋 贵州省畜牧兽医研究所; 贵阳550005; 贵州省生物研究所; 贵阳550009
大鲵虹彩病毒   mcp基因   原核表达   免疫原性  

摘要:根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP(major capsid protein,MCP)基因序列(序列号:KF512820),设计一对特异性引物,以大鲵虹彩病毒贵州分离株基因组DNA为模板,PCR扩增大鲵虹彩病毒MCP基因并测序,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因进行比对,然后将其亚克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后进行Western blot分析。结果显示:PCR扩增出长度为1 392 bp的片段,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因核苷酸序列相似性为99.7%~99.9%,SDSPAGE电泳显示该重组蛋白的相对分子质量约为67×10^3。免疫原性检测结果表明,该重组蛋白可与兔抗大鲵虹彩病毒阳性血清特异性反应,具有免疫原性。

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