首页 期刊 淡水渔业 草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化 【正文】

草鱼鳃组织蛋白双向电泳技术的建立及优化

作者:徐湛宁; 李福贵; 陈杰; 蒋霞云; 邹曙明 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室; 上海201306
鳃蛋白质   双向电泳   蛋白质组学  

摘要:为建立并优化草鱼鳃蛋白质组双向电泳的技术体系,实验将草鱼鳃经裂解处理后,通过固相p H梯度胶条进行一向等电聚焦和SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳进行蛋白分离,对不同的裂解液配方、蛋白纯化方法、IPG胶条的分离范围、上样量和染色方法等进行了探索和优化,并应用lmage Master 2D Platinum 7.0软件对电泳图谱进行了分析。结果表明:采用裂解液中添加DTT来取代Tris和TBP、选择分离范围为pH4-7的IPG胶条和150μg的主动水化上样,电泳结束后对凝胶进行硝酸银染色,获得了覆盖范围广、低背景、高分辨率、适合差异蛋白分析的双向电泳参考图谱。

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